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NEB/HiScribe? T7 High Yield RNA Synthesis Kit/E2040S/50 reactions

價格: ￥2604.00 市場價: 4340.00

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貨號: E2040S-50reactions

品牌: NEB

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- Description:
  TheHiScribeT7HighYieldRNASynthesisKitisanextremelyflexIBLesystemforinvitrotranscriptionofRNAusingT7RNAPolymerase.ThekitallowsforsynthesismanykindsofRNAincludinginternallylabeledandco-transcriptionallycappedtranscripts.
  
  RNAsynthesizedfromthekitissuitableformanyapplicationsincludingRNAstructureandfunctionstudies,ribozymebiochemistry,probesforRNaseprotectionassaysandhybridizationbasedblots,anti-senseRNAandRNAiexperiments,microarrayanalysis,microinjection,andinvitrotranslationandRNAvaccines.
  
  Thekitcontainssufficientreagentsfor50reactionsof20μleach.Eachstandardreactionyieldsupto180μgofRNAfrom1μgcontroltemplate.Eachkitcanyieldupto9mgRNA.For³²Plabeling,thekitcontainsenoughreagentsfor100?reactionsof20μleach.?
  
  MaterialsNotIncluded:
  - DNATemplate:TheDNAtemplatemustbelinearandcontaintheT7?RNAPolymerasepromoterwithcorrectorientationinrelationtotargetsequencetobetranscribed.?
  - CapAnalogs:NEB#S1411,#S1404,#S1405,#S1406and#S1407?
  - Modified-NTP:Biotin-,Fluorescein-,Digoxigenin-,orAminoallyl-NTP?
  - Labeling:[α-³²P]labeledribonucleotide(800-6,000Ci/mmol)?
  - General:37°CincubatororPCRmachine,nuclease-freewater?
  - DNaseI:DNaseI(RNase-free)(NEB#M0303)?
  - Purification:Buffer-orwater-saturatedphenol/chloroform,ethanoland3Msodiumacetate,pH5.2,spincolumns?
  - GelAnalysis:Gelsandrunningbuffers,gelapparatus,powersupply
  Figure1.TranscriptionbyT7RNAPolymerase
  
  Figure2.TimecourseofstandardRNAsynthesisfromthreeDNAtemplates
  
  Reactionswereincubatedat37°CinaPCRmachine.TranscriptswerepurifiedbyspincolumnsandquantifiedonNanodrop?Spectrophotometer.
  Figure3.EffectoftemplateamountonRNAyield
  
  Standardreactionswereincubatedat37°CinaPCRmachinefor2hours.TranscriptswerepurifiedbyspincolumnsandquantifiedonNanoDrop?Spectrophotometer.
  Figure4:ImprovedRNAyieldandintegrityfromextendeddurationtranscriptionreactions
  
  reactionswereassembled,induplicate,accordingtothemanufacturers’suggestedprotocolsusing3ngofdsDNAtemplateencodinga1.8kbRNA,andincubatedat37°Cfor16,24and40hours.Ateachtimepoint,thecorrespondingtubesweretransferredto-20°Ctostopthereaction.Transcriptionreactionswerecolumnpurifiedafterthelasttimepoint.
  
  (A)Transcriptyield–Aftercolumnpurification,RNAconcentrationwasmeasuredusingaNanoDropspectrophotometerandtotalRNAyieldwascalculated.ThesedatademonstratethatasubstantiallyhigheryieldofRNAwassynthesizedusingtheHiScribeT7HighYieldRNASynthesisKitascomparedtothecompetitor’skit.
  
  (B)Transcriptintegrity–150ngofcolumnpurifiedRNAwasruna1.2%denaturingagarosegel,stainedwithethidiumbromideandvisualizedbyUVfluorescence.ThedatademonstrategreatlyimprovedtranscriptintegrityafterextendeddurationRNAsynthesisreactionsusingtheHiScribeT7HighYieldRNASynthesisKitascomparedtothecompetitor’skit.
  KitComponents
  Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
  Storeat(°C) Concentration
  ATP? -20 100mM
  GTP? -20 100mM
  UTP? -20 100mM
  CTP? -20 100mM
  10XT7ReactionBuffer -20 10X
  FLucControlTemplate -20 0.5μg/μl
  T7RNAPolymeraseMix -20
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GTP?	-20	100mM
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CTP?	-20	100mM
10XT7ReactionBuffer	-20	10X
FLucControlTemplate	-20	0.5μg/μl
T7RNAPolymeraseMix	-20