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注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。
產品介紹Human IL-6 ELISA Kit (Human Interleukin-6 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人白細胞介素 6 ELISA 試劑盒，可以定量檢測人血清、血漿或細胞培養上清液等樣本中的天然和重組 IL-6 濃度。白細胞介素6是一種由淋巴、非淋巴細胞產生的多功能細胞因子。IL-1、TNF、IFN-β、PDGF、LPS、PolyⅠ-C、A 23187和PMA等對IL-6的產生具有正調節作用。人IL-6的 cDNA序列有212個氨基酸殘基，含兩個潛在的N -糖基化位點。成熟IL-6由疏水N末端28個氨基酸殘基信號肽裂解產生，含184氨基酸殘基，其中有四個半胱氨酸殘基，分子量為21 kDa。在氨基酸水平上，人IL-6與小鼠IL-6具有42％的同源性，人的IL-6對小鼠某些細胞有刺激作用。人IL-6基因位于第7號染色體，長約5 kb，此細胞因子基因由5個外顯子和4 個內含子組成。IL-6與G-CSF和IFN-β有較高同源性，對骨髓造血細胞和髓樣白血病細胞的某些作用也有相似之處。IL-6由多種細胞產生，對免疫應答、急性期反應、造血和神經系統有多方面作用。IL-6的生物學活性主要包括調節免疫應答、調節造血系統、誘導急性期蛋白、調節腫瘤生長、調節神經內分泌系統和其它6個方面。IL-6與臨床上多種疾病的發生均有關系。與自身免疫性疾病，腫瘤均有密切的關系。IL-1和TNF-α對IL-6引起的病理損傷可能有協同作用。應用IL-6治療由放療、化療所致血小板減少癥并且作為疫苗佐劑已進入臨床試驗。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中人 IL-6 濃度。在人 IL-6 單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 IL-6 會與其單抗結合，洗去游離成分；加入生物素化的抗人 IL-6 抗體，抗人 IL-6 抗體與結合在單抗上的人 IL-6 結合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結合，洗去未結合的酶結合物；加入顯色劑，若反應孔中有 IL-6，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現藍色；加終止液變為黃色。在 450 nm 下測 OD 值，人 IL-6 濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中人 IL-6 濃度。
UE-H6132S/H6132M/H6132L◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結合較差。使用ELISA板，而非組織培養板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現規則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結合較差。使用酶標板，而非組織培養板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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