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NEB/p19 siRNA Binding Protein/M0310S/5,000 units

價格: ￥3744.00 市場價: 6240.00

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貨號: M0310S-5,000units

品牌: NEB

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- Description:
  Thep19siRNABindingProtein(19kDa)fromtheCarnationItalianRingspotVirus(CIRV)plantbindssiRNAswithnanomolaraffinity(1).Thedimericproteinbinds21basesiRNAswitha2base3′extensionanda5′phosphate.TheproteinbindsRNAinasizedependentandsequenceindependentmanner.IfthesiRNAsare4baseslonger,theaffinityfortheproteinisreducedabout100-fold(2).Whenp19siRNABindingProteinisexpressedinplantsitsuppressesRNAinterference(3).
  
  Figure1:
  
  SizespecificbindingofsiRNAbyp19siRNABindingProtein.ThreephosphorylateddsRNAsof17,21and25bases(30ngeachband)weremixedwithincreasingamountofp19siRNABindingProtein(0-3μg)ina20μlreaction,andincubatedatroomtemperaturefor1hour.Thereactionwasanalyzedona20%polyacrylamidegelstainedwithethidiumbromide.MarkerMisthesiRNAMarker(NEB#N2101).
  Highlights
  - FortheisolationofsiRNA
  - Isolatedfromarecombinantsource
  ProductSource
  p19siRNABindingProteinisclonedandexpressedin?E.coli?asafusionproteinwithanaminoterminalMBP(maltosebindingprotein)andacarboxyterminal?CBD(chitinbindingdomain).
  ReagentsSupplied
  Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
  Storeat(°C) Concentration
  p19siRNABindingBuffer?(200?μl) 2X
  Notes:
  p19siRNABindingProteincanselectivelybindsiRNAsinthepresenceofa2,000foldexcessofotherRNAs.1Xp19siRNABindingBuffer:20mMTris-HCl,100mMNaCl,1mMEDTA,1mMTCEP,0.02%Tween-20(pH7.0@25°C)p19siRNABindingProteindoesnotbindssRNA.Double-stranded21bpRNAwitha2-baseoverhanganda5′phosphatebindsthemostefficiently.Double-strandedmiRNAswithmismatchedbasepairswillbindwithloweraffinity.Duetothedifferenceinmolecularweightbetweenp19siRNABindingProteinandsiRNA,a10to20-foldexcessofp19siRNABindingProteinisneeded.TCEP(Tris2-carboxyethylPhosphine)canbereplacedwithDTT(dithiotreitol)intherequiredsolutions.However,ifDTTisused,itneedstobeaddedseparatelyintothereaction.
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