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NEB/SNAP-Cell? Oregon Green?/S9104S/50 nmol

價格: ￥4068.00 市場價: 6780.00

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貨號: S9104S-50nmol

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- Description:
  SNAP-CellOregonGreenisaphotostablegreenfluorescentsubstratethatcanbeusedtolabelSNAP-tag?fusionproteinsinsidelivingcells.Thiscell-permeablesubstrate(BG-OregonGreen)isbasedontheInvitrogendye,OregonGreenandissuitableforstandardfluoresceinfiltersets.Ithasanexcitationmaximumat490nmandanemissionmaximumat514nm.ConjugatesofOregonGreenaremorephotostablethanthoseoffluorescein,andtheirfluorescencepropertiesareessentiallypHinsensitiveinthephysiologicalpHrange.Thispackagecontains50nmolofSNAP-CellOregonGreensubstrate,sufficienttomake10mlofa5μMSNAP-tagfusionproteinlabelingsolution.
  
  TheSNAP-tagisanoveltoolforproteinresearch,allowingthespecific,covalentattachmentofvirtuallyanymoleculetoaproteinofinterest.TheSNAP-tagisbasedonmammalianO⁶-alkylguanine-DNA-alkyltransferase(AGT).SNAP-tagsubstratesarederivativesofbenzylguaninesandbenzylchloropyrimidines.Inthelabelingreaction,thedye-substitutedbenzylgroupofthesubstratebecomescovalentlyattachedtotheSNAP-tag.?
  
  Therearetwostepstousingthissystem:subcloningandexpressionoftheproteinofinterestasaSNAP-tagfusion,andlabelingofthefusionwiththeSNAP-tagsubstrateofchoice.ExpressionofSNAP-tagfusionproteinsisdescribedinthedocumentationsuppliedwithSNAP-tagplasmids.ThelabelingofthefusionproteinswiththeSNAP-tagsubstrateisdescribedbelow.?
  
  Figure1:?LiveU2OScellstransientlytransfectedwithpSNAP-Cox8A(mitochondrialexpression).
  
  CellswerelabeledwithSNAP-CellOregonGreen(green)for15minutesandcounterstainedwithHoechst33342(blue).
  Figure2:?
  Excitation(dottedline)andemissionspectraaftercouplingofSNAP-CellOregonGreentoSNAP-taginbufferatpH7.5.
  
  Notes:
  Storage:SNAP-CellOregonGreenshouldbestoredat-20°C(longterm)orat4°Cinthedark(shortterm,lessthan4?weeks).Protectthesubstratefromlightandmoisture.Withproperstorageat-20°Cthesubstrateshouldbestableforatleastthreeyearsdryor3monthsdissolvedinDMSO.SNAP-CellOregonGreenisnotsuitableforlabelingofcellsurfaceSNAP-tagfusionproteins.TheOregonGreendyeisbasedonafluorinatedfluoresceinmodifiedwithpivaloylgroupswhichisunchargedandessentiallynon-fluorescent.Itbecomesfluorescentonceinsidethecellwhereitishydrolyzedbynon-specificesterases.
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